结核分枝杆菌基因敲除技术服务

技术原理与实验步骤

采用噬菌体介导的同源重组进行基因敲除:首先构建同源交换位点(AES)，随后将其整合到结核分枝杆菌噬菌体基 因组中，获得噬菌粒(phasmid);将噬菌粒导入耻垢分枝杆菌，获得整合有同源交换位点的重组噬菌体，经体外扩 增获得高滴度的重组噬菌体，对结核分枝杆菌进行转染;将转染后的结核分枝杆菌涂布到含潮霉素抗性的固体培养基 上，37°C培养 4-5 周，挑取单克隆，通过 PCR 等方式进行验证。

服务流程

1.客户提供敲除基因编号；

2.构建同源臂及包装噬菌体；

3.噬菌体感染结核菌并验证阳性克隆；

4.提交结核分枝杆菌基因敲除菌株（液体）及实验相关的引物、测序结果、详细的结题报告。

服务周期4-6个月。

适用菌株

广泛适用于结核分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、牛结核分枝杆菌、海分枝杆菌。