技术原理与实验步骤
质粒是广泛存在于细菌、放线菌、酵母菌等生物中，赋予这些生物抗药、抗重金属等特性，对质粒进行有目的的改造后可以用于目的基因的片段扩增、目的基因的特异表达等，已经成为现代生物学必不可少的工具。
质粒的构建主要用到常用的分子生物学实验如PCR、限制性核苷酸酶切、DNA连接酶连接、转化大肠杆菌感受态细胞等。PCR用来扩增目的基因片段，涉及引物设计、退火温度的摸索、DMSO浓度优化等多种过程，快速准确的PCR对质粒构建过程有重要影响，然而有的基因片段由于GC含量高、含有特殊结构等，在进行PCR时特别困难；质粒载体改造需要进行各种目的基因片段的酶切、连接等过程，是很耗时的过程。
晶诺生物有专业的研究人员，从事分子生物学研究多年，对质粒构建富有经验，可在短时间内高效率的完成构建过程。在产品研发的过程中，积累了丰富的质粒构建经验，尤其擅长结核菌、荧光互补、融合蛋白等相关领域的质粒构建，可根据顾客需求提供相关技术服务。
结核杆菌基因PCR及质粒构建：
对基因组高GC含量的结核菌PCR有独特的方法和丰富的经验，可高效率地完成高难度基因PCR，根据客户提供的载体信息，选择合适的酶切位点，经酶切连接后构建需求质粒。
荧光互补技术(BiFC)质粒构建：
eGFP荧光蛋白合理的拆分并与目的蛋白相连，可用于研究蛋白相互作用，根据客户需求，可提供荧光标记质粒及研究蛋白相互作用的BiFC质粒。
融合蛋白表达质粒构建：
融合蛋白是两个蛋白通过柔性多肽linker相连，具有两个蛋白的功能，并可能具有额外的优势，如激活新的信号通路、特异的细胞靶向性等，在新药物开发中有广阔的前景，我们已经构建并表达了GMCSF-IL4、IL4-GMCSF、GMCSF-IL10、IL10-GMCSF等多种融合蛋白质粒，经验丰富，根据客户提供的基因、载体信息，我们可提供需求融合蛋白表达质粒。
服务流程：
- 客户提供目的基因及载体信息及需求
- 设计引物，进行PCR，PCR产物、载体进行酶切并连接转化，挑取菌落提取质粒测序
- 发送产品：构建好的阳性菌液及质粒，相关的引物信息，PCR、酶切电泳图，测序结果。
服务周期：1-2周
