还在为高GC基因扩增问题而烦恼吗？还在为质粒构建繁琐、复杂而苦闷吗？
今天跟大家分享一下晶诺是如何处理和解决这些问题的。
晶诺生物是一家专注于分枝杆菌相关基础和应用研究的公司，而分枝杆菌基因组以高GC含量闻名，在分子克隆方面会经常遇到这些问题，那么晶诺是如何解决这些问题的呢？
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Q: 在分枝杆菌的分子克隆实验中都会遇到哪些障碍呢？
A: 分枝杆菌的分子操作容易出现这样、那样的问题，但最主要的可以归结为三个。其一，像是分枝杆菌这类菌，基因GC含量高，基因模板复杂难以克隆；其二，基因片段普遍较长，克隆中容易出现突变问题。其三，就是质粒构建方面，采用传统的PCR产物克隆也就是使用酶切、回收、连接方法费时费力、过程繁冗，而且往往会受限于没有合适的酶切位点，且阳性克隆率也较低。
Q: 那么是如何解决的呢？
A: 我们多年的实验经验针对前面的问题解决方法如下：
1、采用高扩增效率的高保真聚合酶能有效解决长片段、高GC含量基因扩增问题，而且错误率很低。
2、使用无缝克隆产品，大大提高质粒和基因连接的实验效率。
但存在的弊端是进口品牌的高保真聚合酶、组装试剂盒价格昂贵，整体成本消耗比较高且到货周期相对较长。
为彻底解决这个问题，我们自己着手研发了高保真聚合酶、无缝克隆试剂盒等产品，这些自主研发产品，在我们自己实验室经历了长时间的测试，效率、保真度绝对可以媲美国际大品牌。自己动手，丰衣足食！
这么好用的分子克隆工具，怎么可能不跟大家分享一下呢？晶诺现推出系列工具酶产品，包括高保真DNA聚合酶、Taq DNA聚合酶、无缝克隆试剂盒、T4连接酶、Taq 连接酶、DNA maker，协助各位老师在实验室高效、准确地完成DNA克隆、载体构建等分子操作，让分子克隆实验操作更加简单、便利、高效！
产品一：Hi-Fi DNA Polymerase
| 产品名称 | 产品货号 | 规格 |
|---|---|---|
| Hi-Fi DNA Polymerase | 60070E-500U | 500U |
| Hi-Fi DNA Polymerase | 60070E-1000U | 1000U |
该产品为高保真聚合酶套装，其中配备了Hi-Fi DNA Polymerase、缓冲液（5X DNA Polymerse Reaction Buffer）、dNTP、MgCl2、DMSO，配备齐全，只需自备模板及引物，按照说明书配置反应体系。
产品优势：
1、高保真性，扩增DNA片段准确度高，6 kb以下片段0突变。
2、快速扩增，15-30s可扩增约1kb DNA，耗时短，整体缩短PCR扩增时间。
3、扩增长片段，可扩增长达10 kb的DNA片段。
4、适用广泛，可扩增复杂DNA、高GC含量DNA片段。
5、灵敏度高，低拷贝的DNA模板可扩增出高质量目的基因。
PCR效果图：
PCR扩增不同长度(0.1-8 kb)片段的的电泳图，该产品可扩增出高产量（DNA浓度400ng/ul）、长DNA片段（0.1-8kb）、高质量（6k以下0突变）的PCR产物，其效果绝对可以媲美国际大品牌！
产品二：Taq DNA Polymerase
| 产品名称 | 产品货号 | 规格 |
|---|---|---|
| Taq DNA Polymerase | 60080E-500U | 500U |
| Taq DNA Polymerase | 60080E-2500U | 2500U |
该产品为Taq DNA聚合酶，其中配备了Taq DNA Polymerase、缓冲液（10X Taq Reaction Buffer），按照说明书配置反应体系。在PCR反应中，Taq DNA聚合酶的延伸率约为1-2kb/min。
产品优势：
1、用于TA克隆。
2、扩增片段的长度可达5 kb(简单模板)。
3、具有较好的热稳定性，95℃下半衰期超过40 min。
4、相较于高保真聚合酶具有更低的成本。
5、短片段克隆及PCR验证的理想产品。
PCR效果图：
PCR扩增不同长度(0.1-5 kb)片段的电泳图，该产品可扩增出高产量（DNA浓度400ng/ul）、长DNA片段（0.1-5kb）的PCR产物。
产品三：无缝克隆试剂盒
| 产品名称 | 产品货号 | 规格 |
|---|---|---|
| One Step Cloning Kit | 60210K-10T | 10T |
| One Step Cloning Kit | 60210K-20T | 20T |
| Hi-Eff Seamless Cloning Kit | 60220K-10T | 10T |
| Hi-Eff Seamless Cloning Kit | 60220K-20T | 20T |
该产品分为 Hi-Eff Seamless Cloning Kit 及 One Step Cloning Kit 两种产品，其中Hi-Eff Seamless Cloning Kit是一款高效实用的无缝克隆产品，One Step Cloning Kit是一款价格更为优惠、高性价比的无缝克隆产品，两种产品均为无缝克隆预混剂，只需加入待组装DNA片段，简化了实验操作，可避免操作过程中的污染问题。
Hi-Eff Seamless Cloning Kit
产品优势：
1、操作简单，产品为预混剂，直接加入DNA片段。
2、快速高效，50℃反应1小时即完成反应。
3、阳性率高，2片段组装阳性克隆率达95%以上。
4、多片段连接，一次性可连接高达4-5个片段，一步完成，大大提高了工作效率。
该产品使载体构建更简单、便捷、高效！
One Step Cloning Kit
产品优势：
1、操作简单，产品为预混剂，直接加入DNA片段。
2、快速高效，30℃反应40 min即完成反应。
3、阳性率2片段组装阳性克隆率达70%以上。
4、多片段连接，一次性可连接高达3-4个片段。
无缝克隆原理示意：
第一步：PCR获取目的片段，这里可以使用我们上述提到的晶诺高保真DNA聚合酶。
第二步：线性化载体，可使用酶切或PCR的方法，特别是找不到合适酶切位点的载体，可直接使用晶诺高保真聚合酶，高效扩增长片段。
第三步：将目的片段、线性化载体混合到无缝克隆预混剂中，重组反应。
第四步：将反应体系转化至大肠杆菌感受态，获取阳性克隆，即完成载体构建实验。
产品四：T4 DNA Ligase
| 产品名称 | 产品货号 | 规格 |
|---|---|---|
| T4 DNA Ligase | 60090E-1WU | 10000U |
| T4 DNA Ligase | 60090E-2WU | 20000U |
| T4 DNA Ligase | 60090E-10WU | 100000U |
T4 DNA Ligase 在ATP作为辅助的情况下，可以特异性催化双链DNA或者双链RNA的5’磷酸和3’羟基之间形成磷酸二酯键。本产品对与粘性末端和平末端的双链核酸片段均有较高的连接活性。
本品适用于DNA片段与载体连接、二代测序中文库构建的接头连接等实验。
产品优势：
1、酶活性高：酶比活性高，反应重复性好。
2、连接快速：30 min即可完成连接反应。
3、适用性广：无论是粘性末端还是平末端，本产品均有较高的连接活性；无论是DNA连接还是RNA连接，本产品都有很好的适用性。
连接效果：
T4 DNA Ligase连接效果胶图
1：进口品牌T4连接酶；2：晶诺T4连接酶；M: maker。
在20μL反应体系中加入1μg的1.5 kb片段（HindIII酶切），16℃反应30min，结果表明晶诺T4连接酶具有较高的连接效率，绝对可媲美进口大品牌产品！
产品五：Taq DNA Ligase
| 产品名称 | 产品货号 | 规格 |
|---|---|---|
| Taq DNA Ligase | 60120E-1KU | 1000U |
| Taq DNA Ligase | 60120E-2KU | 2000U |
| Taq DNA Ligase | 60120E-1WU | 10000U |
Taq DNA连接酶是一种耐高温连接酶，它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸和3´-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对，且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生。该产品内容物为Taq DNA 连接酶 (40U/μL)及缓冲液（10X Taq DNA Ligase Reaction Buffer [+]NAD）。
晶诺Taq DNA连接酶是一款高酶活、高品质的连接酶产品，可应用于克隆连接、无缝克隆、连接酶链式反应和连接酶检测反应对等位基因进行特异性检测等方面。
产品优势：
1、快速高效，只需15分钟即可完成连接反应。
2、价格优惠，相较于市场上同类产品，价格更优惠。
*以上产品图片为示意图，实际包装可能进行调整升级，请知悉。
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