技术服务

蛋白生物学技术服务-EMSA

技术原理与实验步骤

凝胶迁移实验又称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验(EMSA,electrophoretic mobility shift assay),是一种用于研究蛋白与核酸相互作用的技术。这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理,当蛋白与一条人工标记后的DNA或RNA结合后,其在PAGE中的迁移率将小于未结合蛋白的DNA或RNA,从而检测到蛋白与DNA或RNA结合。DNA与RNA可通过32P同位素标记,但是由于放射性因素,实验时间和安全性都不方便实验开展;现在一般通过生物素标记DNA或RNA,通过化学发光法检测。

服务流程

  1. 客户提供DNA序列信息;
  2. 制备DNA探针并进行生物素标记;
  3. 标记好的探针与蛋白孵育结合;
  4. 孵育好的探针-蛋白混合物进行凝胶电泳,电泳条带转印到尼龙膜上;
  5. 化学发光显色法进行检测;
  6. 发送结果:DNA探针信息、化学发光显色结果及分析结果。